DNase I柱上消化试剂盒(DNA消化酶，RNase free)
| 货号 | 次数 |
| NP09011 | 50次 |
试剂盒组成、储存、稳定性
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组成 |
保存 |
50 次 |
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DNase Buffer |
-20℃ |
1.25 mL x 2 |
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RNase free DNase I |
-20℃ |
0.25 mL |
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去蛋白液 RW1 |
常温或 4℃保存 |
40 mL |
DNase Buffer -20℃保存， 去蛋白液 RW1 常温或者 4℃ 保存，RNase free DNase -20℃保存，避免反复冻融。
注意： DNase Buffer 含 Mn2+ ，可能有轻度发黄发黑， 甚至 黑色沉淀为正常现象， 颠倒混匀后正常使用即可。
产品介绍
任何总 RNA 提取试剂在提取过程中无法完全避免 DNA 的 微量残留，本公司的 RNA 提取产品，由于采取了本公司独特的 缓冲体系和特殊硅胶吸附膜，可以去除绝大多数的 DNA 污染， 所以一般不用进行 DNase I 消化。但是对于一些敏感的下游实 验，需要去除微量的 DNA 残留，可以购买本公司 DNase I 柱上 消化试剂盒（RNase free） ，直接在离心吸附柱上面消化残留 的 DNA， 然后纯净 RNA 可以洗脱下来直接使用。本产品兼容所 有硅胶膜离心柱式 RNA 提取试剂盒。
产品特点
·简单快速，条件经过优化，一般 15 分钟可以消化清除硅胶 膜上残留 DNA。
·确保 RNase free， 可以保证 RNA 分子完整性。
·兼容性广，可整合进所有硅胶膜离心柱式 RNA 提取试剂盒柱 上消化，不需要提取到总 RNA 后再单独去除里面的残留 DNA。
注意事项
DNase 是非常敏感，易物理损坏变性丧失活性，所以不要 漩涡混匀 DNase I 和工作液。轻轻吹打或者上下颠倒混匀混合液。 每次在抽提 RNA 抽提前配置新鲜的工作液。DNase I buffer 是 和 RNase-free DNase I 配套专门用于柱上消化， 一般的 10 x DNase buffer 并不能用于膜上的 DNase 消化，不能替代。
操作步骤
1. 按照正常 RNA 提取步骤操作，裂解混合物过柱离心完全 后（RNA 包括残留 DNA 吸附到离心柱硅胶膜上） ，加入去蛋白 液 RW1 步骤前按照以下步骤操作。
2. 取一个新的 1.5mL 离心管，加入 45μL DNase I buffer 和 5μL RNase free DNase I，轻轻吹打混匀成 DNase I 工作 液（处理多个离心柱子要按照比例放大制备工作液）。置冰上备用。
注： 如果残留 DNA 过多导致消化不完全，可按比例加 大 使 用 酶 量 来 提 高 消 化 效 果（如 90μL DNase I buffer 和 10μLRNase free DNase I）。
3. 向 NE 吸附柱中加入 350μL 去蛋白液 RW1，12,000 rpm 离心 30 秒，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
4. 向 NE 吸附柱中央加入 50μL 的 DNase I 工作液，室温 （20-30℃)放置 15 分钟。注意直接将工作液滴在膜中央上， 不要让工作液滴在 O 型圈或是离心柱管壁上。
5. 向 NE 吸附柱中加入 350μL 去蛋白液 RW1， 12,000 rpm 离心 30-60 秒，弃废液，将吸附柱放回收集管中。
6. 接漂洗液 RW 步骤等后续步骤。如果是其它公司试剂盒， 则接最后的一个漂洗液漂洗等后续步骤。
说明书：
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