miRNA 反转录试剂盒（TaqMan 法）ZS-M15004
Superbrilliant® miRNA 反转录试剂盒（TaqMan 法）
Superbrilliant® TaqMan miRNA Reverse Transcription Kit
Cat. No.: ZS-M15004
Superbrilliant® TaqMan miRNA Reverse Transcription Kit
Cat. No.: ZS-M15004
组分：
储存：请置于-20°C，可保存 2 年；避免反复冻融。
简介：SuperbrilliantTM miRNA 反转录试剂盒（TaqMan 法）专用于 miRNAs 分子的反转录试验，转录获得的 cDNA 产物用于 TaqMan 定量 PCR 方法检测miRNAs 分子（仅适用 SuperbrilliantTM TaqMan miRNA 定量 PCR 预混液，货号：ZS-M15002，配合 SupersmartTM TaqMan miRNA 定量 PCR 探针使用，货号：ZS-MT-XXXXX 使用）。
SuperbrilliantTM miRNA 反转录试剂盒（TaqMan 法）采用加 A 法进行反转录，加 A 法的反转录效率远高于茎环法，因此，采用该方法可极大的提高检测灵敏度（原理见图 1）。该试剂盒操作简单，仅需要两步即可轻松完成 miRNA 的 cDNA合成，合成的 cDNA 可用于所有 miRNA 的后续定量检测。反转录完毕后采用特异性的上游引物和接头引物进行 PCR 扩增，FAM 标记 TaqMan 探针作为荧光报告基团进行定量检测（原理见图 1）。
图 1，SuperbrilliantTM TaqMan miRNAs 定量检测原理
操作方法
1 按以下组分在 0.2ml EP 管中配制应液
2 在 PCR 仪上按以下条件进行加 A 反应:
3 反应完毕后，在上述 5μl 反应体系中加入如下试剂，并混合均匀。
4 在 PCR 仪上按以下条件进行反转录反应:
获得的 cDNA 产物可用于多个目标 miRNA 的检测。反转录完毕后获得的 miRNA cDNA，可加入20~80μl ddH20稀释 2~5 倍，通常取2μl即可用于SuperbrilliantTM TaqMan miRNA 定量 PCR 预混液检测（货号：ZS-M15002，配合 SupersmartTM TaqMan miRNA 定量 PCR 探针使用，货号：ZS-MT-XXXXX 使用，该探针有一万余种，详细列表可查询 SuperbrilliantTM TaqMan miRNA qPCR kit.xls）。
5 利用 SuperbrilliantTM TaqMan miRNA 定量 PCR 试剂盒对上述 miRNA cDNA产物进行 RealTime PCR 检测内参基因可选择使用：SuperbrilliantTM TaqMan RNU6B 定量 PCR 探针(货号：ZS-MT-RNU6B)适用于人、鼠等哺乳动物组织、细胞样品； SuperbrilliantTMTaqMan hsa-miR-16 定量 PCR 探针(货号：ZS-MT-miR-16)适用于来源于人、鼠全血样品。
（1）配制反应体系
按照如下组分配制 20μl PCR 反应体系：
（2）进行 Real-Time PCR 反应
通常采用两步法，程序如下：
（收集信号采用 FAM 染料通道）
反应结束后确认 Real-Time PCR 的 cDNA 样品和 NTC 阴性对照的扩增曲线
(hsa-miR16)。
现价：
¥
1274.00
原价：
¥1498.00
