25 分钟超高纯植物组织基因组 DNA 提取试剂盒 ZS-M11004

Superbrilliant® 25 分钟超高纯植物组织基因组 DNA 提取试剂盒
Superbrilliant® 25 min High quality Plant Tissue Genomic DNA Extraction Kit

Cat. No.: ZS-M11004

ꄴ前一个： PCR 级血液基因组 DNA 直提试剂盒 ZS-M11011

ꄲ后一个： 18 分钟通用基因组 DNA 提取试剂盒 ZS-M11002

组分：

储存：

（1）蛋白酶 K（20 mg/ml）、Rnase A（20 mg/ml）长期保存请储存于-20 ℃，短期室温保存（6 个月），其它组分储存于室温避光保存。

（2）该试剂盒的保质期为 2 年。

简介：该试剂盒采用独特的裂解液，裂解能力强，提取速度快，在高盐浓度下使DNA 高效特异的结合到硅基质离心吸附柱上，并在低浓度盐和微碱条件下释放DNA，能够高效提取多种不同植物组织中的基因组 DNA。除普通植物材料外，也适用于从富含多糖、多酚植物中提取 DNA。可快速可靠的从多糖、多酚含量较高的植物组织样品中纯化出高纯度的 DNA。可纯化获得最大为 50 kb 的 DNA，多数片段在 20-30 kb 之间。本试剂盒可最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染。提取的基因组 DNA 片段大，产量高，纯度好，稳定可靠。应用本试剂盒提取的 DNA 无蛋白、核酸酶污染，可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、Southern 杂交等多种分子生物学实验。

注意事项：

（1）本试剂盒中的 Washing Buffer 中已经加乙醇，无需单独添加。

（2）Solution P2 含有 CTAB，室温储存会出现白色沉淀，使用前放置于 56℃水浴锅中溶解后使用。

（3）自备试剂：氯仿。

操作方法

（1）样本组织悬液制备

研钵研磨法：在 1.5 ml EP 管中加入 600 μl 裂解液 Solution P1，并在管盖上加入 5 μl Rnase A。将研磨后的植物组织（干重 40~60 mg，湿重 150-200 mg）加入到 Solution P1 裂解液中，漩涡震荡混合 15 s。

钢珠研磨法：在研磨 EP 管中加入 700 μl 的裂解液 Solution P1，加入植物组织（干重 50~80 mg，湿重 200 mg），并加入钢珠进行研磨，研磨完毕后，600μl 的组织悬液到新的 1.5 ml EP 管中，并在管盖上加入 5 μl 的 Rnase A。

（2）向上述组织悬液中加入 250 μl 裂解液 Solution P2，漩涡混合 15s，56℃水浴锅（或室温）静置 5min，以消化 RNA。

（3）向上述溶液中加入 20 μl Protease K，漩涡混合 10s，于 56℃水浴锅（或室温）中消化 5~15 min。

（4）13,000rpm 离心 5 min，吸取 600 μl 上清到新的 1.5 ml EP 管中，并加入500 μl 的氯仿，漩涡混合 15 s。

（5）13,000 rpm 离心 2 min，溶液将分为无色上层水相（DNA）、中间层（蛋白）和绿色下层油相（酚类）。

（6）吸取 400 μl 上层无色上清液到新的 1.5 ml EP 管中，并加入 450 μl 的Solution P3 溶液，漩涡 10s 后，倒入到吸附柱中，13,000 rpm 离心 1 min。

（7）倒掉废液。向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer，13,000rpm 离心 15s。重复此步骤一次。

（8）将吸附柱重新放回离心机，13000rpm 空离心 2min，将残留的乙醇彻底甩干。

（9）将吸附柱芯放入到 1.5 ml 收集管中，向吸附柱芯中加入 60~150 μl EB，将 EB 或灭菌水加热至 65℃使用，将会提高基因组 DNA 的洗脱效率。室温放置 1min，13,000rpm 离心1min，洗脱液即为基因组 DNA，冷冻保存。

Fig1.利用 SuperbrilliantTM 25 min High quality Plant Tissue Genomic DNAExtraction Kit 提取不同植物的基因组 DNA，海芋叶子（1-2），鹅掌木叶子（3-4），大豆种子（5-6），玉米种子（7），M 为 Marker 10000。