Benzonase 高能核酸酶 ZS-PR23001
Superbrilliant® Super Benzonase Nuclease
Cat. No.: ZS-PR23001
储存：置于-20C保存。
简介：Benzonase 核酸酶可以将核酸完全消化成 3-5 碱基长度(杂交限度以下) 的 5’-单磷酸寡核苷酸，最适合从重级蛋白中去除核酸的操作，符合 FDA 关于 核酸污染的处理规程。Benzonase 核酸酶是来自 Serratiamarcescens, 经基因 工程改进的核酸内切酶。它能降解所有形式(包括单链， 双链，线性和环状)的 DNA 和 RNA 而没有蛋白裂解活性，在广泛条件范围具有很高的特异性。 Benzonase 核酸酶迅速水解核酸的能力使该酶成为降低粘度以减少处理时间和 增加蛋白产量的最佳选择。该酶与 BacReady-Protein Extraction Solution 和 RIPA Lysis Buffer 等蛋白抽提试剂配合使用，从而消除粗提物中的核酸，降低 粘度。
单位定义：在 30 分钟内使△A260 值降低 1.0 (相当于完全消化 37 μg DNA) 的酶量定义为一个活性单位
适用领域：
1. 蛋白提取时去除核酸污染
2. 蛋白双向电泳
3. Western Blot
4. 免疫共沉淀
操作方法：
1. 组织处理方法：将 30-50mg 动植物组织研磨充分后，加入 100-200 μl WB 超能高效 RIPA 裂解缓冲液(货号：ZS-PR21001)，同时加入 1 μl Benzonase 核酸酶，旋涡振荡混合均匀，室温孵育 30min。
2. 细胞处理方法：将 106 -107 悬浮细胞液 6,000 rpm 离心 10min 后，弃掉上 清液，使用 100 μl RIPA 裂解液重悬细胞，同时加入 1 μl Benzonase 核酸 酶，旋涡振荡混合均匀，室温孵育 30min 。注意：贴壁细胞重悬于 PBS 后， 处理方法同悬浮细胞。
3. 大肠杆菌细胞处理：将 500 μl E.coli 培养液 8,000rpm 离心 5min 后，弃 掉上清液，使用 100 μl 100 μl RIPA 裂解液重悬细胞，同时加入 1 μl Benzonase 核酸酶，旋涡振荡混合均匀，室温孵育 30min。
4. 裂解步骤完成后，将裂解产物于 13,000 rpm 离心 10min 后，取上清即为 提取蛋白 (包涵体蛋白留取沉淀为提取蛋白) 。
5. 提取完蛋白后可利用 Superbrilliant® BCA 蛋白定量试剂盒 (货号： ZS-PR25001) 测定蛋白浓度。
