Z5 超保真 DNA 聚合酶 ZS-M12005
Superbrilliant Z5 Plus High-Fidelity DNA Polymerase
Cat. No.: ZS-M12005
组分:
储存:-20C可保存 3 年,避免反复冻融。
简介:对于测序、SNP 检测、蛋白表达和基因功能研究等应用而言,高保真扩 增是很关键的。Z5 Plus 超保真 DNA 聚合酶是一种具有超高保真性能和卓越扩增 活性的 DNA 聚合酶,它具有 3’-5’核酸外切酶的校正活性,保真度为 Taq DNA 聚合酶的 100 多倍。基于其扩增能力强、产量高、保真性高、特异性强等优势, 可广泛应用于载体构建、突变修复、基因合成、DNA 测序等高保真要求较高类 型的试验。该酶扩增获得的产物不含有 “A”尾,可直接克隆于 Superbrilliant® ZERO-Blunt 零背景平末端克隆载体(ZS-M16002) 进行克隆测序,如需进行 T/A 克隆,需在 PCR 产物末端添加“A”后进行克隆。Z5 超保真 DNA 聚合酶具有 非常高的保真度,对长至 10kb 的片段、高 GC 含量模板具有非常高的扩增效率, 大大了缩短扩增时间。
单位定义:一个活力单位即在 74°C 条件下,30 分钟内催化 10 nmoldNTP 的掺 入反应成为酸不溶性物质所需的酶量。
PCR 反应性能:以λ DNA 为模板,扩增 15kb DNA 片段;以人类基因组 DNA 为 模板, 扩增 8kb DNA 片段。
反应实例
1. 按以下组分配制 PCR 反应液
* 1 模板 DNA 用量参数(50 μl 反应体系)
2. PCR 扩增循环参数
1) 在以质粒为模板的情况下,可按照 5kb/min 设置延伸时间,在以基因组 DNA 和 cDNA 为模板条件下,可按照 2kb/min 设置延伸时间。
(2) 使用Z5 进行 PCR 反应时引物长度通常在 18~23bp 为宜,GC 含量 40~60%为最佳。GC 含量超过 65% 以上的模板建议使用 Superbrilliant® 5×高 GC 含量&长片段辅助 buffer (货号:ZS-M12012) 。
(3) 由于 Z5 DNA 聚合酶具有较强的引物模板结合能力,通常情况下 TM 值较 Taq DNA 聚合酶高 3~5°C 。因此,退火温度可提高 3~5°C。