18 分钟快速高纯细胞基因组 DNA 提取试剂盒 ZS-M11001
Superbrilliant® 18 min Fast/High quality Cell Genomic DNA Extraction Kit
Cat. No.: ZS-M11001
组分：
储存：
（1）Protease K（20 mg/ml）、RNase A（20 mg/ml）长期保存请储存于-20 ℃ ,短期室温保存（6 个月），其它组分储存于室温避光保存。
（2）该试剂盒的保质期为 2 年。
简介：该试剂盒采用独特的裂解液，裂解细胞核释放基因组 DNA ，由硅胶膜柱 在高盐浓度下可逆吸附基因组 DNA,并在低浓度盐和微碱条件下释放 DNA。经蛋 白酶消化、漂洗液清洗，可快速可靠的从细胞样本中纯化出高纯度的 DNA ，最 大限度的去除蛋白、色素、脂类等杂质污染。应用本试剂盒获取的 DNA 纯度高， 无抑制剂，A260/A280 为 1.6-1.9 。应用本试剂盒提取的 DNA 无蛋白、核酸酶 污染，可直接用于限制性酶切反应、PCR 、文库构建、Southern 杂交等多种分子生物学实验。
注意事项：
（1）本试剂盒中的 Washing Buffer 中已经加乙醇，无需单独添加。
（2）Solution B1 储存时可能会有白色结晶沉淀，放置于 56 ℃水浴锅溶解后，不影响使用效果。
操作方法：
（1）样本处理（1.5 ml EP 管中处理）
贴壁培养细胞（<106 个）: 胰酶消化完毕后，离心收集细胞沉淀，用 50 μl 水重悬细胞沉淀，加入 5 μl RNase A 和 100μl Solution B1 漩涡 15 s ，56 ℃水浴锅中消化 5 min。
悬浮培养细胞（<106 个）：直接离心收集细胞沉淀，用 50 μl 水重悬细胞沉淀，加入 5 μl RNaseA 和 100 μl Solution B1 漩涡 15 s，56 ℃水浴锅中消化 5 min。
（2）向上述准备好的样品溶液中加入 20 μl 蛋白酶 K 漩涡混合均匀 15 s，56℃水浴锅中消化 5 min。
（3）加入 700μl Solution B2 漩涡震荡混合均匀 1 min，13000 rpm 离心 3 min。
（4）将上清液倒入到吸附柱中，13000 rpm 离心 1 min。
（5）倒掉废液。向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer，13000 rpm 离心 15 s。重复此步骤一次。
（6）将吸附柱重新放回离心机，13000 rpm 空离心 2 min，将残留的乙醇彻底甩干。
（7）将吸附柱芯放入到 1.5 ml 收集管中，向吸附柱芯中加入 60~150 μl EB（EB 预热到 65℃将提高洗脱产量），室温放置 1min，13,000rpm 离心 1 min，洗脱液即为基因组 DNA，冷冻保存。
常见问题：堵塞离心柱
原因和解决方法：（1）样品量过大，减少细胞的用量；（2）细胞沉淀重悬不充 分，导致细胞团块未能完全裂解。（3）已经发生堵塞现象，请用 200 μl 吸头 在滤芯上，轻划几次，再进行后面离心步骤，并延长离心时间，一般不会影响 DNA产量。
Fig 1. 以 SuperbrilliantTM 18 min Fast/High quality Cell Genomic DNA Extraction Kit 提取的 4 只小鼠脾细胞基因组为模板扩增 KLF4 基因。
