第三代 ZAPA SYBR Green qPCR 预混液(2×) ZS-M13002
Superbrilliant® 2×ZAPA3G SYBR Green qPCR Mix
Cat.No.: ZS-M13002
组分:
储存：
(1) 长期保存，请避光置于-20C可保存 3 年，或-80C长期保存。
(2) 经常使用，融化后可置于 4C，可保存 1 年。
(3) 长期-20℃保存可能会出现沉淀，室温融化后混合均匀，不影响试剂性能。
简介：本产品是采用 SYBR Green 嵌合荧光法进行 Real-Time PCR 的专用试 剂，其中第三代 ZAPA SYBR Green qPCR 预混液(2 ×)是将化学修饰的热启动 Taq DNA 聚合酶、反应 Buffer、dNTP 染料等试剂预混的 2 ×浓度的单组分预 混试剂。进行实验时，PCR 反应液的配制十分方便简单，只需加入引物、模板、 水即可。
产品中的 DNA 聚合酶为第三代 DNA 聚合酶，同时该聚合酶具有最高的耐受杂 质能力，其对乙醇、胍盐、肝素等具有极高的耐受性，因此对于纯度较差的 DNA 模板，该 Mix 仍然可以获得理想的实验结果。该酶经化学修饰，采用专有的热 启动技术确保 50C以下 100% 无活性，因此可在室温建立反应体系，只有 95 度条件下加热 5min 后才能完全恢复酶的活力，从而启动 PCR 扩增，提高 PCR 扩增的特异性。能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二 聚体引起的非特异性扩增。随着热循环的不断进行，剩余的酶活会源源不断地释 放出来，这就使得此酶克服了常规 Taq 酶容易出现平台期的弊端，其扩增效率 大大提高，提高特异性 PCR 产物的产量、准确性和精确性。该试剂盒独特的反 应缓冲液，可在宽范围。中得到良好的扩增结果、检测灵敏度更高、信号更强。
操作方法
1. 按照如下组分配制 20 μl PCR 反应体系：
2. 进行 Real-Time PCR 反应,通常采用两步法，程序如下：
Stage 1: 95C 5 min*
Stage 2: 95C 10s
60C 20s 40 cycles (ABI 7500 普通模式为 60C 30s) Stage 3: 溶解曲线 (该步骤使用 PCR 仪器默认程序即可)
注意：由于该酶为化学修饰的热启动 Taq DNA 聚合酶，必须于 95C加热 5min
才能恢复酶的活性，该热启动步骤不能缩短时间。
3. 反应结束后确认 Real-Time PCR 的扩增曲线、融解曲线和标准曲线。
