5×快速 SYBR Green qPCR 预混液 ZS-M13001
Superbrilliant® 5×Fast SYBR Green qPCR Mix
Cat.No.: ZS-M13001
组分：
储存：
(1) 长期保存，请避光置于-20C可保存 3 年，或-80C长期保存。
(2) 经常使用，融化后可置于 4C，可保存 1 年。
简介：本体系是用于染料法 (SYBR Green I) 实时荧光定量的预混体系。产品 含有优化浓度的 HotStart Taq DNA Polymerase、dNTPs 、Mg2+、反应缓冲液和 稳定剂等成分，主要用于 cDNA 和基因组 DNA 等的特异性超高灵敏度定量检测。 SYBR Green I 在游离状态下的荧光比较微弱，一旦与双链 DNA 结合后，其荧光 会大大增强。通过检测荧光强弱就可以定量检测 PCR 过程中扩增产生的双链 DNA 的数量。
本 SYBR Green qPCR Mix 将抗体封闭的热启动 Taq DNA 聚合酶、反应 Buffer、 dNTP、SYBR Green 染料等试剂预混在一起，是一种 5 ×浓度的单组分预混试剂， 进行实验时，PCR 反应液的配制十分方便简单，只需加入引物、模板、水即可。 制品中的 DNA 聚合酶为抗体封闭的 Hot Start Taq DNA 聚合酶，该酶在50 度 以下无活性，只有 95 度条件下加热后才能完全恢复酶的活力。该试剂盒独特的 反应缓冲液，可在宽范围中检测更灵敏，信号更强，显著提高了 PCR 的扩增效 率。具有高扩增效率、高扩增特异性和宽广的可信范围的特点，对于不同来源、 不同丰度的目的基因都具有良好的适应性和准确的定量结果。本产品具有广泛的 样本普适性，对具有复杂高级结构的模板、PCR 抑制剂残留较多的模板以及长 片段扩增等具有非常好的适用性。在不影响 PCR 效果的前提下更快获得结果， 节约科研时间和能源。
操作方法
1. 按照如下组分配制 20 μl PCR 反应体系：
2. 进行 Real-Time PCR 反应,通常采用两步法，程序如下：
Stage 1: 95C 30s
Stage 2: 95C 5~10s
60C 20s 40 cycles (ABI 7500 普通模式为 60C 30s)
Stage 3: Dissociation analysis
3. 反应结束后确认 Real-Time PCR 的扩增曲线、融解曲线和标准曲线。
Fig 1. Superbrilliant® TRI RNA 裂解液提取的小鼠心肌细胞 HL-1 的 RNA，中实 基因第四代高效耐热 MuLV 反转录酶反转的cDNA 为模板，5 ×快速 SYBR Green qPCR 预混液进行荧光定量 PCR 检测 Actin 和 MCP 基因。
