6 分钟耐热首链 cDNA 合成试剂盒 ZS-M14003
Superbrilliant® 6 min 1st Strand cDNA Synthesis Kit
Cat. No.: ZS-M14003
组分:
储存：请置于-20°C ，可保存 3 年；避免反复冻融。
简 介：本产品是专为两步法 RT-PCR 第一步实验配制的cDNA 第一链合成试剂 盒。本试剂盒采用稳定高效的反转录预混体系 5 × Fast Plus RT Master mix 进行 RNA 的反转录反应，使用时只需加入模板、引物和 RNase Free H2O 即可，大大简化了操作过程、提高了效率、减少了操作过程中的人为误差和 RNA 的降解可 能 。该 预 混体 系包含 点突 变 致 RNase H 活 性缺失 的 MuLV V Reverse Transcriptase 反转录酶、dNTP、反应 Buffer 和 RNase Inhibitor。该试剂盒采用的反转录酶去除了 RNase H 活性，以避免反转录过程中降解 RNA。同时经过突变文库筛选，使得其更强热稳定性，耐受50C以上高温反应，在 65C条件下仍具有 30% 以上活性，与本公司 MuLV IV Reverse Transcriptase 反转录酶相比提高逆转录效率和反应速率。该酶采用高温反转录时更充分打开 RNA 二级结构，提高对复杂 RNA 模板的扩增性能、提高反转录 cDNA 的长度和产量， 从而提高后续检测的灵敏度。本品能利用极低量 RNA 合成cDNA 第一链，起始 样本量可低至 pg 级。MuLV V Reverse Transcriptase 反转录酶与 RNA 亲合能力更强，经过基因改造后含有快速合成结构域，将反转录酶的延伸速度提高了
3-4 倍，因此适用于快速反转录反应；加入科学优化反应 Buffer 使其获得更高产 量的cDNA，从而提高后续检测的灵敏度。合成的第一链 cDNA 可广泛用于 2nd Strand 的合成、杂交、PCR 扩增、Real-Time PCR 反应、以及全长 cDNA 文库的构建等.
应用：
(1) 该制品可有效反转录 mRNA 、tRNA、LncRNA、ncRNA 等
(2) 该制品不可反转录 microRNA、病毒 DNA/RNA 样品
操作方法：
1. 按以下组分配制反转录反应液
*注：反转录引物可根据需要改用特异性引物。
2.反应程序
50°C 5min (第一链 cDNA 合成)
95°C 1 min (失活 MuLV)
3. 采用 0.25-2 μl 反转录产物，作为后续定量 PCR 或 PCR 的扩增模板即可。
