LAMP 扩增检测试剂盒 (基于浊度指示)ZS-M17002
Superbrilliant® LAMP-Turbidity Amplification Kit
Cat.No.:ZS-M17002
储存：
LAMP Lyophilized Turbidity Reagent 为干粉形式，包含 Bst 4.0 DNA 聚合酶、dNTP 等，在未溶解前，该制品可-20℃长期保存，并可室温运输，性能无下降。LAMP Lyophilized Turbidity Reagent 使用前每瓶用 750μl 的 LAMPTurbidity Buffer 溶解后，可立即使用，剩余试剂可在-20℃保存 1 个月，在-60℃以下长期保存。
简介：
Bst DNA 聚合酶是 Bacillus stearothermophilus DNA 聚合酶的一部分，具 有很强的链置换活性，以及 5’→3’的 DNA 聚合酶活性，因此可以应用于 LAMP(Loop-mediated isothermal amplification)检测实验。该制品内含 Bst4.0 DNA 聚合酶因此既可以扩增 DNA ，也可以直接扩增 RNA 分子。
LAMP 是一种新型核酸扩增技术，采用4 或 6 条能够识别目的基因上的6 个特异 区域的引物，依赖与 Bst DNA 聚合酶的强链置换活性，在 30~60 分钟内 DNA 扩增可达 109~1010 倍。
在 LAMP 的高效反应过程中会产生大量的焦磷酸根离子，其与镁离子结合形成焦 磷酸镁白色沉淀，因此在实验过程中可通过检测反应液的浊度变化进行实时定量 检测。也可在反应结束后肉眼直接观察焦磷酸镁沉淀，根据是否形成白色沉淀来 判断反应是否发生。
注意事项：
(1).为了减少交叉污染，请分区操作 (试剂和模板 DNA 的配置操作最好在不同区 域中进行) 。
(2).各区物品均为专用，不可交叉使用，防止污染。
(3).实验过程中应穿工作服，带手套，建议使用带滤芯的一次性吸嘴。
(4).在 LAMP 反应结束后禁止将反应管盖打开，否则可能会导致气溶胶污染。一 旦发生气溶胶污染，请使用本公司 Superbrilliant® DNA 气溶胶污染消除剂 (ZS-M18005)进行环境清理。
使用方法：
1. 按以下组分配置反应混合液
首次实验时 LAMP Primer Mix 分别采用 1、1.5、2 μl 进行预实验。
2. 反应体系配好后，充分混匀并短暂离心，置于 60~65°C 进行反应 (首次实验 可采用60℃) ，连接 LAMP 实时浊度仪，对浊度变化进行实时检测。也可肉眼 分别于 20min、25min、30min、45min 观察浊度变化。
3.LAMP 实验的条件优化
(1) LAMP Primer Mix 配置
(2)四个参数对成功建立 LAMP 检测方法至关重要，分别是：引物位置；引物使 用浓度；反应温度；反应时间。引物使用浓度、反应温度、反应时间是优先要确 认的参数，如经过参数调整后仍不能达到检测用标准，则重新设计引物组合，再 进行测试。
