核酸染料的用法

核酸染料主要用于核酸染色,一般可分为胶染法、泡染法两种使用方式。

 

胶染法:

 

1. 制胶时加入GelRed核酸染料,例如:每50mL琼脂糖溶液中加入5μL GelRed 10,000×储液,以此比例类推。

2. 按照常规方法进行电泳。

3. 不需要脱色,必要的话可以水洗以降低背景值。

4. 使用标准的透照仪(302或312 nm)观察染色凝胶,成像使用溴化乙锭滤光器,SYBR 或 GelStar滤光器凝胶成像也可以得到很好的结果。

 

泡染法:

 

1. 按照常规方法进行电泳。

2. 用H2O将GelRed 10,000×储液稀释约3300倍到0.1 M NaCl中,制成3×染色液。(例如将15μL GelRed 10,000×储液和5 mL 1 M NaCl加到45 mL H2O中)。

3. 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中,缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶,室温振荡染色30 min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30 min到1 h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。

4. 染色液可重复使用2-3次,室温下避光保存。

 

这两种方法的详细步骤和注意事项可以从专业生物化学书籍或数据库中获取。

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