亚克隆细胞培养
亚克隆细胞培养主要分为以下步骤:
1. 细胞亚克隆:从原有的克隆中筛选出具有某种特性的细胞进行培养,这些特性可能包括特定的表型、基因型或者分化状态等。在分子克隆中,也可以从大片段的克隆中选取特定小片段再克隆。
2. 培养基准备:准备HT完全培养基,其中含有1×HT和20%胎牛血清的1640完全培养基。另外,还需要准备杂交瘤培养添加剂(如Frdbio,MCC0014)。
3. 饲养细胞准备:这些细胞可能是杂交瘤细胞或骨髓瘤细胞等。在制备过程中,需要注意饲养细胞的融合状态和数量。
4. 细胞亚克隆:将亚克隆后的细胞株进行有限稀释法或半固体培养基法培养。半固体培养基法可参照杂交瘤细胞铺板培养中的半固体培养基培养相关内容。
5. 腹水生产:如果需要,可以从亚克隆后的细胞株中选出阳性值最高的孔进行第二次亚克隆,以得到单个细胞(单克隆)分裂生长的细胞。
以上步骤仅供参考,建议查阅相关文献或咨询专业人士以获得更准确的信息。