牙周膜细胞的原代培养步骤如下：
1. 实验材料及主要仪器设备：DMEM培养基、胶原酶、胰蛋白酶、小牛血清、ABC免疫组化试剂盒、二氧化碳恒温培养箱、医用净化工作台、倒置相差显微镜、其它为国产分析纯。
2. 人PDLC的原代培养：所选牙齿均无龋坏、尖周炎及牙周炎。 PBS冲洗2次后，加入0.125％ 胰蛋白酶及0.1％胶原酶5ml，37℃振荡下消化30～60min。镜下观察，组织松散、大部分细胞游离时，用吸管吹打使其彻底分散。将消化的细胞悬液经190目筛过滤，收集并离心（1000 r/min，10 min），弃去上清液。
以上步骤仅供参考，建议阅读相关论文，以获得更全面更准确的信息。
