小鼠原代心肌细胞培养

小鼠原代心肌细胞培养步骤如下:

 

1. 准备心肌细胞分离所需试剂和器材,包括Hanks液、低糖DMEM液、高糖DMEM液、胰酶消化液、双抗液、碳酸氢钠液、盐酸液等。

2. 取小鼠,将其放置在铺有棉的鼠盆中。

3. 取出心肌组织,注意器械无菌。

4. 将心肌组织剪粹成0.1mm的小片,并用PPS清洗。

5. 用分次消化法,在37℃的摇床中进行消化。消化时间要把握好,并用胰蛋白酶进行消化。

6. 消化好后直接接种于96孔板中进行试验备用。离心的速度不能大快,否则心肌细胞就会有很多死细胞。

7. 接种后需在无菌环境下培养,可以添加一定量的杀非心肌细胞的物质。

 

以上步骤仅供参考,心肌细胞培养对无菌环境要求极其严格,操作也相对复杂,建议您在专业人士指导下进行。

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