神经胶质细胞培养
神经胶质细胞培养的步骤如下：人或鼠的脑组织可用于神经胶质细胞培养，不仅能获得生长的胶质细胞也可以形成能传代的二倍体细胞系。
1. 设备：无菌操作设备、解剖显微镜、CO2培养箱、倒置显微镜、常温冰箱、低温冰箱、电热干烤箱、高压消毒锅过滤器、渗透压仪等。
2. 培养器皿及手术器械 ：常用35mm塑料及玻璃皿、解剖取材用15mm-90mm直径培养板、培养瓶、吸管等均需泡酸、洗涤、灭菌后方可使用。
3. 组织块法：脑组织块接种到培养器具中培养并维持培养环境，添加适量的无血清培养基，用双面刀片把脑组织切成大约1立方毫米的小块，接种到培养瓶中，加入DMEM/F12培养液，放入5%CO2，37℃孵育箱内培养，每天观察贴壁细胞生长情况。
4. 酶解法：胰蛋白酶用DMEM/F12混合液稀释后作用一段时间，再将组织分散成单个细胞，将单细胞悬液接种到培养瓶中培养。或者把脑组织块放入培养瓶中，加入0.125-0.25%胰蛋白酶在37℃孵育30min，移入接种液，停止消化，洗去胰蛋白酶液，用细口吸管吹打细胞悬液，使其充分分散，如此多次，待沉淀后吸出上层细胞悬液做后续原代培养。
5. 抑制胶质细胞生长：当培养3-5天后用阿糖胞苷或5-FU抑制神经胶质细胞的生长。
6. 观察：细胞接种6-12小时开始贴壁，贴壁后细胞有集合现象出现。不同种类的神经细胞其生长情况也会有所改变。
以上步骤仅供参考，建议查阅专业文献资料，并咨询专业人士获取更全面和准确的信息。
