ta克隆的机制

TA克隆方法(Original TA Cloning Kit)主要利用PCR技术和具有3’-T突出的载体DNA连接起来。这个方法的出现主要是因为PCR反应中所使用的聚合酶具有末端转移的活性,通常在3'加上A。例如:Taq聚合酶同时具有的末端连接酶的功能,PCR反应时在每条PCR扩增产物的3`端自动添加一个3`-A突出端。只有用经过特殊处理的具有3’-T突出末端的DNA片段才能通过T/A配对进行连接。

 

通过这个方法,我们可以获得目的基因片段,但是由于往往不清楚目的基因的DNA序列,因此需要通过TA克隆的方法,将目的片段重组到T-载体中,然后通过序列测定来明确DNA序列。以上信息仅供参考,可以咨询生物相关专业人士,了解更准确的信息。

新闻资讯

News