血红蛋白elisa
血红蛋白的ELISA测定主要用来检测血液中的血红蛋白浓度。这种测定方法基于血红蛋白与辣根过氧化物酶缀合的抗体发生反应,通过显色底物来测定与免疫吸附剂结合的酶,从而确定血红蛋白的浓度。
在测定过程中,首先将血红蛋白与吸附在聚苯乙烯微量滴定表面的抗血红蛋白抗体反应。洗涤未结合的蛋白质后,再加入与辣根过氧化物酶缀合的抗HM抗体(HRP)。HRP缀合的抗体与先前结合的血红蛋白形成复合物。再经过一次洗涤,最后通过添加显色底物测定与免疫吸附剂结合的酶。结合酶的数量与血红蛋白浓度成正比,从而确定测试样品中血红蛋白的量。
需要注意的是,标本溶血会干扰测定结果,因此采集血液时应注意手法,避免用力振荡,严防标本溶血;同时,采集的新鲜标本应尽可能当时测定,无法当时测定的样本,5d之内应4℃保存,1周后检测应低温冻存;另外,收集标本应采用无菌试管,以防止标本污染。
