RACE(rapid-amplification of cDNAends)简介

RACE(rapid amplification of cDNA ends)是一种用于在已知序列的末端扩增未知序列的技术。它可以扩增出未知基因或mRNA的5'端或3'端,以帮助完成基因的克隆和测序。

 

RACE技术利用反转录酶(Reverse Transcriptase)在RNA模板上逆转录出cDNA,并在cDNA的末端加上一个特定的引物序列(称为锚定引物或poly(T)引物)。然后使用PCR反应,利用锚定引物与基因的已知区域引物进行扩增。

 

对于5' RACE,反转录酶以基因的mRNA为模板,在mRNA的3'末端逆转录出cDNA,并在cDNA的5'末端加上锚定引物。然后使用锚定引物与基因的已知区域引物进行PCR扩增,以扩增未知序列。

 

对于3' RACE,反转录酶以特定的引物(例如oligo(dT)引物)为模板,在mRNA的5'末端逆转录出cDNA,并在cDNA的3'末端加上锚定引物。然后使用锚定引物与基因的已知区域引物进行PCR扩增,以扩增未知序列。

RACE技术在研究基因功能、寻找蛋白质交互伙伴、分析基因表达调控等方面具有重要应用。它可以在没有完整基因序列信息的情况下获取基因的未知序列,为进一步的研究提供了重要的起点。

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