TAE缓冲液的配制方法

TAE缓冲液是在分子生物学实验中常用的缓冲液,广泛应用于DNA电泳、DNA扩增、DNA纯化等多种实验中。由于其使用频繁,所以熟悉TAE缓冲液的配制方法对于进行分子生物学实验很重要。本文将详细介绍TAE缓冲液的配制方法。

 

 

以下为TAE缓冲液的配制方法:

 

 

一般先配制50倍的TAE缓冲液,用时再稀释成1倍的。
50TAE缓冲液的配制方法为:
1. 称取下列试剂1L烧杯中: Tris 242g
Na2 EDTA.2H2 O 37.2g
2.向烧杯中加入约600mL的去离子水,充分搅拌溶解。
3.加入57.1mL的醋酸,充分搅拌。
4.加去离子水将溶液定容至1L后,室温保存。

 

 

50XTAE配法:

 

先配制0.5M EDTA pH8.0的缓冲液(按分子克隆的说法是在加有EDTA二钠盐的悬浊液中加入适量氢氧化钠,同时搅拌,直至溶液澄清,此时溶液pH约为8);


再称适量的TRIS溶解在适量的水中,加入EDTA贮存液与冰醋酸,定容混匀即可,按实验使用规模大小可配1一10L不等。具体配方见上述答案。

1XTAE 1L
50XTAE 20ml
H2O to 1L

注:EDTA应按酸根离子摩尔数换算药品质量,因其相关产品有无钠无水的,有二钠二水的,应仔细斟别换算。

 

 

以上步骤是TAE缓冲液的详细配制方法。虽然TAE缓冲液制备简单、成本低廉,但也存在着一些需要注意的问题。例如,在调整pH值时不要加入过量的pH调节剂,以免对实验产生影响;当储存在冰箱中时,TAE缓冲液最好采用无色瓶存放,不容易衰变。熟记这些细节,能够帮助我们快速、有效地制备出符合要求的TAE缓冲液,从而保证实验的成功。

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