如何选择热启动Taq酶/DNA聚合酶

热启动Taq酶应用较广，与普通DNA聚合酶相比，热启动Taq酶能有效避免一些非特异扩增和引物二聚体的形成，能有效提高目标基因的扩增成功率。特别在基因检测领域，热启动Taq酶已被确定为行业强制性标准，普通DNA聚合酶不得使用。由此可见，热启动Taq酶应用非常广泛。目前国内市场上销售的热启动Taq酶的品牌很多，但真正高质量的热启动Taq酶并不多，面对这么多的热启动Taq酶产品，我们应如何选择？

一、选择扩增效率高的热启动Taq酶

PCR扩增效率与Taq酶的性能密切相关，好的Taq酶反应体系经优化后，扩增效率在95%以上，起始模板量扩增范围宽。在目标基因含量较低时能够获得满意的扩增，在模板量较高时，也不易中毒，指数扩增期较长。而性能较差的Taq酶，即使反应体系经多次优化，扩增效率仍达不到90%，扩增曲线“S”型不明显，斜率较小，曲线低平。模板量较低时扩增不出来，较高时扩增效果也不理想。因而，选择高扩增效率的DNA聚合酶对PCR、qPCR能否成功至关重要。

二、选择酶动力强的热启动Taq酶

Taq酶的酶动力与扩增效率有关。一般热启动Taq酶的酶动力越强，PCR扩增的指数增长期越长，‘S型’曲线更加典型，荧光信号值更高，而且更适合做多重PCR检测。酶动力弱的品牌DNA聚合酶一般只能支持2重反应，在做3重反应时，扩增曲线低矮，荧光信号值较低，无典型扩增曲线，结果很难判定。

三、选择灵敏度高的热启动Taq酶

一般来说，DNA聚合酶的扩增效率高，灵敏度就高，但也有不一致的情况。如果要扩增的样本目标基因丰度较低，建议对Taq酶的扩增灵敏度进行检测。最常见的检测方法是将目标基因质粒片段进行10倍或5倍梯度稀释，在较低的几个稀释度进行PCR检测，选择检测灵敏度较高的热启动Taq酶。

由此可见，研究者需根据自己的实验要求和经费情况进行选择，最好做一个梯度稀释扩增实验，以检测热启动Taq酶的扩增效率和灵敏度。

核小体（北京）生物技术有限公司生产的5X 高效 Taq PCR 预混液（with Dye），含有高纯度的 Taq DNA 聚合酶（具有扩增效率高、错配率低的优良性能）、dNTPs、MgCl 2 、反应缓冲液、PCR 增强剂和稳定剂，使用时只需加入模板、引物和水，使其工作浓度为 1×, 即可进行反应，大大简化了操作过程、提高了效率、整个反应体系非常稳定、减少了 PCR 操作过程中的人为误差、节约操作时间、降低污染几率，具有快速简便、重复性高、特异性好、灵敏度高和稳定性好的特点。

产品图片