双荧光素酶报告基因检测服务
| 编号 | 项目名称 | 周期 | 价格 |
| TS51701 | 双荧光素酶报告基因检测服务 | 4-8周 | 9000 |
服务简介
荧光素酶报告基因系统是以荧光素（luciferin）为底物来检测萤火虫荧光素酶（fireflyluciferase）活性的一种报告系统。检测使用Promega双荧光素酶报告基因检测试剂盒。荧光素酶可以催化luciferin氧化成oxyluciferin，在luciferin氧化的过程中，会发出生物荧光（bioluminescence），可通过荧光测定仪设备测定luciferin氧化过程中释放的生物荧光，常应用于启动子转录活性调控及miRNA靶基因验证等方向研究。
服务内容
1. 启动子转录活性调控
- 用生物信息学方法分析并预测启动子区可能的转录因子结合位点。
- 设计引物用PCR法从基因组DNA中克隆所需的靶启动子片段，插入构建到荧光素酶报告基因质粒中。
- 筛选、扩增阳性克隆质粒。
- 将报告基因质粒与转录因子表达质粒共转染细胞，每组平行设定6-10个复孔。
- 检测并进行差异值分析。
2. 检测miRNA作用靶基因检测
- 用生物信息学方法分析并预测miRNA可能的靶基因结合位点信息。
- 设计合成野生型和突变型序列片段，插入构建荧光素酶报告基因质粒中。
- 筛选阳性克隆，测序。扩增克隆并提纯质粒备用，同时准备阴性对照质粒。
- 将报告基因质粒与miRNA共转染细胞，每组平行设定6-10个复孔。
- 检测并进行差异值分析。
我们提供
原始实验数据，及完整的实验报告。
